Obtención de cultivos monospóricos de hongos micorrícicos arbusculares a partir de la combinación de hospedantes interespecíficos de distintas condiciones climáticas
Trabajo de grado - Pregrado
2023-09-28
spa:El orden de los Glomerales del Phylum Mucoromycota, ha ganado gran interés científico debido a sus propiedades benéficas para la agricultura. Muchos cultivos de hongos micorrícicos arbusculares (HMA) en macetas, se han generado a partir de múltiples esporas con la misma o similar morfología, pero sin mucho éxito en la producción de inóculo de alta calidad y libre de contaminación. La técnica de inoculación de una sola espora permite establecer cultivos homogéneos de ciertas especies de HMA, los cuales ayudan a comprender el efecto individual de una especie de hongo en diferentes procesos asociados a las plantas y el suelo, al igual que permite facilitar el estudio de la asociación entre un hongo y una planta específicos. Objetivo: Con este estudio se pretende evaluar el efecto de especies vegetales que crecen en condiciones climáticas diferentes, sobre la obtención de cultivos monospóricos de hongos micorrícicos arbusculares. Métodos: Se implementaron cultivos monospóricos de HMA mediante el uso de las siguientes especies vegetales como hospedantes: Sorghum bicolor, Brachiaria decumbens, Taraxacum officinale y Avena sativa; para esto se utilizó como sustrato suelo proveniente de páramo mezclado con arena de río. Para la extracción de esporas se realizó tamizaje húmedo y decantación de suelo proveniente de la reserva “La Tribuna”; la preparación de las plántulas hospedantes y la germinación de las esporas se llevó a cabo en macetas de plástico previamente esterilizadas. Se prepararon 160 macetas distribuidas en 10 tratamientos con cuatro especies de HMA y cuatro réplicas cada uno, en donde, utilizando parejas de plántulas hospedantes de diferentes especies, se inocularon con una sola espora de HMA y se pusieron a germinar; por último, se examinó la colonización de la raíz mediante tinción con azul de tripano y se cuantificó la producción de esporas y colonización por hifas, vesículas o arbúsculos. Resultados: Se obtuvieron cultivos monospóricos en algunas réplicas tomadas al azar, siendo la especie Glomus sp. predominante en la mayoría de los ensayos, especialmente en los monocultivos de Brachiaria y Diente de león. Avena obtuvo el mayor porcentaje de colonización por HMA entre todos los cultivos trampa, mientras que la Brachiaria a partir del tercer día de fertilización, sufrió una disminución drástica en el porcentaje de colonización en las especies Acaulospora sp01 y Glomus sp; el Sorgo tuvo la mejor afinidad por las especies de hongos implementadas, favoreciendo la simbiosis con la especie Acaulospora spinosa, Acaulospora sp01 y Acaulospora sp02; el diente de león tuvo mejor afinidad por la especie de hongo Glomus sp. Los tratamientos con hospedantes interespecíficos Sorgo x Brachiaria y Brachiaria x Diente de león registraron el mayor número de esporas encontradas, sin embargo, no se encontraron diferencias significativas en la cantidad de esporas entre tratamientos, pero si entre los HMA utilizados. Conclusiones: La elección cuidadosa de la especie de HMA tiene un impacto significativo para maximizar la eficacia de la simbiosis; por otro lado, las combinaciones de plantas hospedantes no parecen tener mayor influencia en la colonización y la capacidad de esporulación de las especies de HMA. eng:Obtaining monosporic cultures of arbuscular mycorrhizal fungi from the combination of interspecific hosts of different climatic conditions. Introduction: The order Glomerales of the Phylum Mucoromycota has gained great scientific interest due to its beneficial properties for agriculture. Many pot cultures of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) have been generated from multiple spores with the same or similar morphology, but without much success in producing high quality, contamination-free inoculum. The single spore inoculation technique allows the establishment of homogeneous cultures of certain AMF species, which help to understand the individual effect of a fungal species on different plant and soil-associated processes, as well as to facilitate the study of the association between a specific fungus and a specific plant. Objective: The aim of this study was to evaluate the effect of plant species growing under different climatic conditions on the development of monosporic cultures of arbuscular mycorrhizal fungi. Methods: Monosporic AMF cultures were implemented using the following plant species as hosts: Sorghum bicolor, Brachiaria decumbens, Taraxacum officinale and Avena sativa; for this purpose, soil from moorland mixed with river sand was used as substrate. For the extraction of spores, wet sieving and decantation of soil from the "La Tribuna" reserve was performed; the preparation of host seedlings and germination of spores was carried out in plastic pots previously sterilized. A total of 160 pots were prepared, distributed in 10 treatments with four AMF species and four replicates each, where, using pairs of host seedlings of different species, they were inoculated with a single AMF spore and germinated; finally, root colonization was examined by trypan blue staining and spore production and colonization by hyphae, vesicles or arbuscules were quantified. Results: Monosporic cultures were obtained in some replicates taken at random, with Glomus sp. species predominating in most of the trials, especially in the Brachiaria and Dandelion monocultures. Oats obtained the highest percentage of AMF colonization among all trap crops, while Brachiaria, from the third day of fertilization, suffered a drastic decrease in the percentage of colonization in Acaulospora sp01 and Glomus sp. species; Sorghum had the best affinity for the fungal species implemented, favoring symbiosis with the species Acaulospora spinosa, Acaulospora sp01 and Acaulospora sp02; dandelion had the best affinity for the fungal species Glomus sp. The treatments with interspecific hosts Sorghum x Brachiaria and Brachiaria x Dandelion recorded the highest number of spores found, however, no significant differences were found in the number of spores between treatments, but between the AMF used. Conclusion: Careful choice of AMF species has a significant impact on maximizing symbiosis efficiency; on the other hand, host plant combinations do not seem to have a major influence on colonization and sporulation capacity of AMF species.
- Biología [112]